蛋白質(zhì)類選擇劑的研究進(jìn)展
蛋白質(zhì)類手性選擇劑因其具有特異的空間立體結(jié)構(gòu)，對許多手性藥物具有手性識別拆分能力，這對于生命科學(xué)和藥物化學(xué)研究及人類的健康都具有十分重要的意義。 蛋白手性選擇劑以添加方式應(yīng)用于對映體拆分存在許多問題與不足，如強(qiáng)紫外背景吸收。為克服這些缺點(diǎn)，學(xué)者們進(jìn)行了許多探索，如將蛋白固載在合適的基質(zhì)上，這樣不僅可以消除蛋白質(zhì)強(qiáng)背景吸收對樣品檢測的干擾，而且還可以減少蛋白質(zhì)的用量，這對較貴的蛋白質(zhì)尤其重要。 因此，尋找相比面積大、表面易改性、易制備的基質(zhì)成為蛋白手性固定相研究領(lǐng)域的一個重要方向。
整體柱的出現(xiàn)，大大促進(jìn)了蛋白固定化領(lǐng)域的發(fā)展，制備的蛋白親和整體柱越來越多地應(yīng)用于手性拆分，相信在手性拆分領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。雖然有機(jī)聚合物整體柱具有制備簡單、結(jié)構(gòu)均勻、重現(xiàn)性較好、柱效較高及可以進(jìn)行快速分離等優(yōu)點(diǎn)，并且在多種色譜模式下獲得了成功應(yīng)用。 然而，有機(jī)聚合物整體柱也存在著固有的缺點(diǎn)，如：機(jī)械強(qiáng)度相對較低，在有機(jī)溶劑作用下，床層會發(fā)生收縮或溶漲，導(dǎo)致柱性能發(fā)生變化，縮短柱壽命，并且其微孔結(jié)構(gòu)不適宜小分子物質(zhì)的分離和分析，柱容量低。
硅膠整體柱則不存在上述缺點(diǎn)，因其特殊結(jié)構(gòu)而顯示出優(yōu)越的性能。該柱同時具有大孔和中孔雙孔結(jié)構(gòu)，其中大孔相互連接形成多孔網(wǎng)絡(luò)以保證流動相快速通過，同時保證較低的背壓;整體柱骨架上的中孔保證了填料的比表面積，增大了柱容量。 這種整體柱的表面可以像傳統(tǒng)的色譜填料一樣進(jìn)行衍生化處理，因此該類整體柱應(yīng)用范圍廣，被用于酸性、堿性、中性以及容易和金屬發(fā)生螯合作用的化合物的分離。 此外，由于硅膠整體柱機(jī)械強(qiáng)度高、穩(wěn)定性好，保證了這種整體柱的重現(xiàn)性、可靠性和使用壽命。
假固定相這一概念來源于膠束毛細(xì)管電動色譜，在膠束毛細(xì)管電動色譜中，存在著類似于色譜的兩相，一相是流動的水相，另一相是類似固定相的膠束相， 膠束相與周圍介質(zhì)的電泳淌度不同，并且可以與溶質(zhì)發(fā)生相互作用，在加壓運(yùn)行過程中不同的溶質(zhì)分子在這兩相之間的作用力的差異導(dǎo)致遷移速度不同而得到分離。 由此可見，膠束毛細(xì)管電動色譜與普通色譜的最主要區(qū)別是它的 “固定相”是移動的，這種移動的“固定相”又被稱之為“假固定相”或“準(zhǔn)固定相”。毛細(xì)管親和電動色譜部分填充技術(shù)很好地利用這一原理，先往毛細(xì)管灌入一段蛋白質(zhì)，形成一個蛋白區(qū)段即假固定相，并在此區(qū)域后引入所要研究的藥物，在加壓運(yùn)行過程中，藥物與蛋白因遷移速度不同，使藥物穿過蛋白區(qū)域先到達(dá)檢測窗口被檢測。 中國糧油儀器在線 http://www.nn8ww.cn/
